Что такое анализ кала пцр

Что такое анализ кала пцр thumbnail

Рolymerase Сhain Reaction (PCR), иначе полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это прогрессивный метод лабораторной диагностики инфекционных заболеваний обнаружения генетических патологий, выявления неопластических клеток в начальной стадии рака.

ПЦР относится к генно-молекулярным исследованиям, что обеспечивает высокую точность показателей, минимизирует риск ложноположительных результатов. Для анализа используется биологический материал – кровь, моча, мазок, экскременты, ликвор (спинномозговая жидкость).

Специфика исследования методом ПЦР

Анализ кала на ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний и дифференцирует их разновидность на генно-молекулярном уровне. В ходе исследования оцениваются макромолекулы ДНК (дезоксирибонуклеиновой кислоты) бактерий, простейших паразитов, глистов или РНК (рибонуклеиновой кислоты) вирусов. Для идентификации достаточно небольшого фрагмента патогена, обнаруженного в экскрементах.

В задачи молекулярной диагностики входит:

  • обнаружение инфекционного агента;
  • идентификация разновидности микроорганизма (вирус, бактерия, простейший и т. д.);
  • дифференциация типа, рода, семейства и т. д.;
  • определение тактики лечения, в соответствии с диагностированным заболеванием.

Образец биоматериала помещают в реактор (амплификатор), добавляют реакционную смесь. При последовательной смене температурного режима разрываются водородные цепи дезоксирибонуклеиновой кислоты, образуются комплексы матрицы с праймерами – короткими генетическими фрагментами.

Реагенты достраивают матричную цепь и в ходе реакции амплификации формируют множественные копии возбудителя. При достаточном количестве копий амплификатор дает качественно-количественную оценку обнаруженному возбудителю.

Макромолекулы РНК и ДНК являются носителями уникальной информации, характерной для определенного вида, поэтому точность результатов ПЦР-диагностики максимально приближена к 100%.

Спектр инфекций, определяемых методом PCR по образцу кала

Полимеразную цепную реакцию используют для диагностики кишечных бактериальных и вирусных инфекций, различных видов гельминтозов, заражения организма простейшими паразитами.

Неполный перечень возбудителей и болезней, определяемых методом ПЦР

Бактерии
Helicobacter pyloriхеликобактер пилориязв желудка и двенадцатиперстной кишки, гастрит, дуоденит, рак желудка
Salmonella speciesсальмонелласальмонеллез
Campylobacteкампилобактериякампилобактериоз
Escherichia coliкишечная палочка (энтеротоксигенные штаммы)коли-инфекция
Shigellaшигелладизентерия
V. cholerae, Berхолерный вибрионхолера
Yersinia pseudotuberculosisиерсинияпсевдотуберкулез (кишечный иерсиниоз)
Вирусы
Rotavirusротавирусротавирусная инфекция
Adenovirusаденовирускишечный грипп
Astrovirusастровирусастровирусная инфекция, гастроэнтерит
Norovirusноровирусноровирусная инфекция
Гельминты и простейшие паразиты
Giardia lambliaлямблиилямблиоз
Enterobiusострицыэнтеробиоз
Ascaris lumbricoidesаскаридыаскаридоз
Trichocephalus trichiurusвласоглавтрихоцефалез
Opisthorchis felineus и Opisthorchis viverriniописторхи (печеночные сосальщики)описторхоз
Taenia soliumсвиной цепеньтениоз
Taenia saginataбычий цепеньтениаринхоз
Echinococcusэхинококкиэхинококкоз
Entamoeba histolyticaамеба дизентерийнаяамебиаз

В большинстве случаев, анализ ПЦР кала назначают для выявления кишечных вирусов, бактерии хеликобактер пилори, лямблий и дизентерийных амеб. Определение глистной инвазии, как правило, проводят посредством обычного исследования экскрементов на яйца глистов. Бактериальные инфекции диагностируют с помощью анализа на дизгруппу.

Во многих клиниках существует стандартный ПЦР-скрининг на кишечные инфекции, вызванные бактериями и вирусами. Профиль включает определение восьми возбудителей (сальмонелла, шигелла, кампилобактерия, кишечная палочка, ротавирус, аденовирус, астровирус, норовирус).

Медицинские специалисты

ПЦР используют для уточнения спорных диагнозов, при получении ложноположительных и ложноотрицательных результатов других исследований. Анализ кала методом полимеразной цепной реакции могут назначить:

  • гастроэнтеролог (взрослый или детский);
  • инфекционист;
  • гепатолог;
  • педиатр;
  • терапевт.
  • проктолог;
  • онколог;
  • диетолог.

По желанию сдать анализ можно самостоятельно на возмездной основе в любом диагностическом центре Москвы и других городов РФ.

Ключевые достоинства PCR-диагностики

Метод полимеразной цепной реакции обладает значительными преимуществами, в сравнении с иными анализами:

  • Подлинность идентификации возбудителей. Определение генно-молекулярной структуры патогенного микроорганизма обеспечивает высокую точность результата.
  • Гиперчувствительность к инфекционным агентам. Для выявления патогена достаточно его молекулярного присутствия в образце кала.
  • Оперативность проведения анализа. Исследование в условиях лаборатории занимает 1-3 дня.
  • Комплексность. Одного образца кала достаточно для проведения анализа на несколько патогенных микроорганизмов.
  • Универсальность. С помощью Рolymerase Сhain Reaction возможно определить практически любых инфекционных агентов. Кроме того, анализ обнаруживает не только активные патогены, но и неактивные (погибшие под воздействием лекарственных препаратов).
  • Специфичность. В отличие от серологических методов, ПЦР не допускает перекрестных реакций иммуноглобулинов с близкородственными не комплементарными антигенами. Такая особенность исключает получение ложноположительных результатов анализа.

Важно! Проведение исследования методом ПЦР возможно только в специально оснащенных лабораториях при условии абсолютной стерильности и высокой профессиональной квалификации персонала. Присутствие любых посторонних ДНК в воздухе может повлиять на итоговые показатели анализа.

Читайте также:  Кто как собирал анализ кала

Ошибочные результаты PCR фиксируются при редком явлении генной мутации бактерий и вирусов.

Контейнеры для анализа кала
Варианты контейнеров для сбора кала на анализы

Подготовка к сдаче биоматериала на анализ

Стандартные правила подготовки перед сбором экскрементов для ПЦР-диагностики включают:

  • Отказ от приема любых медикаментов за 3-4 суток. Энтеросорбенты и антибиотики оказывают влияние на кишечную флору, слабительные лекарства – на моторику кишечника, препараты железа – на окрас экскрементов. Это может «смазать» картину итоговых результатов.
  • Устранение из меню продуктов, провоцирующих интенсивное газообразование (блюда из бобовых, капусту, сдобу и ржаной хлеб), за 2-3 дня.
  • Исключение ректальных суппозиториев и микроклизм.
  • Отказ от употребления спиртных напитков за 2-3 дня.

При назначенной рентгенографии желудка с использованием бария обследование нельзя проходить до сдачи образца кала. Грудным детям за 3-4 дня не рекомендуется вводить новый прикорм.

Сбор биоматериала на анализ

Сбор и транспортировка биоматериала на исследование методом полимеразной цепной реакции допускается только в стерильном контейнере, который необходимо заранее приобрести в аптеке. Аптечный контейнер имеет герметичную крышку и снабжен специальной ложечкой. Сдать образец кала в лабораторию необходимо утром. Максимальный интервал доставки составляет 3 часа.

При сборе кала следует придерживаться алгоритма:

  • Провести гигиену аноректальной зоны без использования мыла (геля).
  • Опорожнить мочевой пузырь.
  • Произвести дефекацию в судно (использовать бумагу или полиэтилен). Если собирать образец из унитаза, неизбежно попадание микробов.
  • Заполнить аптечную емкость на 1/3 часть фрагментами фекалий (для этого использовать ложечку).
  • Герметично закрыть крышку контейнера.
  • Оперативно доставить биологический материал в лабораторию медицинского учреждения.

Важно! Запрещается пить слабительные лекарства (в том числе, травяные сборы и БАДы) и проводить процедуру клизмирования. Образец для исследования должен быть получен естественным способом.

Если незамедлительная транспортировка кала к месту исследования невозможна, плотно закрытый контейнер нужно поместить в холодильнике не более, чем на 12 часов. Хранение экскрементов в морозильной камере или при комнатной температуре делает их непригодными к молекулярному исследованию.

ПЦР диагностика

При сборе каловых масс с подгузника грудного ребенка важно следить, чтобы в контейнер не попали фрагменты гигиенической ткани. Женщинам не рекомендуется собирать кал для ПЦР-диагностики в первую неделю фолликулярной фазы менструального цикла.

Возможные примеси менструальной крови помешают исследованию. При необходимости проведения экстренного анализа влагалище необходимо закрыть гигиеническим тампоном. Молекулярная диагностика чувствительна к попаданию любых примесей.

Во время процедуры сбора биоматериала нельзя касаться внутренней стороны емкости, ложечки и крышки. Реакция амплификации может создать копии ДНК, случайно попавшей с рук. Итоговые данные будут ложными.

Результаты анализа

В указанное время пациент получает бланк с качественной интерпретацией результата. Варианты могут быть:

  • «обнаружено» или «положительно» — наличие инфекционного заболевания;
  • «не обнаружено» или «отрицательно» — отсутствие заражения.

Положительный результат при отсутствии выраженных проявлений болезни свидетельствует о латентном бессимптомном течении инфекции или пребывании возбудителя в стадии инкубации.

Кал на ПЦР
Пример бланка результатов молекулярного исследования кала

Итоги

ПЦР – один из самых информативных диагностических методов. Реакция амплификации базируется на определении ДНК и РНК возбудителей инфекционных заболеваний, что обеспечивает высокую точность результатов.

ПЦР анализ кала позволяет выявить вирусные и бактериальные кишечные инфекции, обнаружить инвазии простейших паразитов и гельминтов, а также на 100% идентифицировать патогенные микроорганизмы. Время выполнения исследования – 1-3 суток, в зависимости от загруженности лаборатории.

Источник

Проведение диагностики различных инфекционных или паразитических процессов в организме может быть только с изучением состава кала. А значит может быть назначено эффективное лечение.

В каких случаях проводится анализ кала на ПЦР

 Если в организме все чаще наблюдаются проблемы, связанные с работой желудочно-кишечного тракта, то самым распространенным в данном случае основной причиной могут быть паразиты, такие как Хеликобактер пилори, лямблии, аскариды и т.д.

Основными симптомами в данном случае будут:  

  • тошнота;
  • тупая или острая боль в животе;
  • чувство тяжести в желудке после приема пищи;
  • отрыжка.
Читайте также:  Анализ кала на копрологию когда собрать

Все это будет главным свидетельствовать о том, что бактерии Хеликобактер пилори, лямблии и прочие паразиты приступили к своему успешному размножению. Если не обращать внимание, то можно просто получить целый ряд серьезных заболеваний, таких как гастрит, язва желудка и двенадцатиперстной кишки и даже к раку. В некоторых случаях могут развиваться  различные виды лимфом.

Именно по этой причине, следует обращаться в медицинские центры или в поликлиники для проведения обследования. Используя различные методы, специалисты позволят не только выяснить причину, но и помогут с лечением. И чем быстрее будут сданы все анализы, тем быстрее можно будет избавиться от проблемы.

Во время проведения комплексного исследования, одним из важных анализов является сдача анализов на ПЦР. Что такое ПЦР? Под полимеразной цепной реакцией понимается проведение культуральных и иммунологических анализов кала. Чаще всего это будут прямые методы проведения исследования, благодаря которым будет возможно получить результаты о том, есть ли в организме патологические агенты, такие паразиты как лямблии, хеликобактер пилори и т.д.

Для этого следует проводить анализ кала. При этом согласно методам  комплексного исследования, будет выявляться присутствие продуктов жизнедеятельности различных видов паразитов или следы реакции иммунной системы организма на воздействие различных патогенов. Чаще всего, могут проводиться прямые исследования, позволяющие обнаруживать вредоносные микроорганизмы, а так же их ДНК.

Осуществляя различные виды анализов кала, для проверки его на наличие хеликобактериоза, будет проводиться не инвазивными или нетравматичными видами. Подобные виды исследований будут  существенно отличаться от традиционных в таком случае сборе крови или проведении гастродуоденоскопии.

Какие исследования могут проводиться

Методы, которые используют специалисты для определения наличия в организме паразитов и болезнетворных микроорганизмов, будут самыми различными. В их число входят такие методы анализа кала как культуральный и иммунологический.

При этом под культуральным методом будет пониматься проведение бактериологического посева. Его еще называют микробиологическим методом проведения исследования. В целом, он позволяет выявлять такие виды заболеваний как хеликобактер пилори, лямблии и т.д. За основу  этого метода берутся исследования биологического материала. Для этого он будет помещаться в специфическую среду, которая будет наиболее подходящей для его роста и размножения, создавая колонию. Для каждого вида паразита существуют свои сроки для быстрого развития. Например, хеликобактер пилори или лямблии размножается за неделю. После этого начинаются лабораторное изучение культуры.  Одновременно с этим специалисты будут искать специфичный антиген, свойственный для данного вида.

Во время исследования, будут выявляться различные патологические антигены, являющиеся возбудителями заболевания. Такой анализ на антигены даст возможность при помощи тестов проверить чувствительность паразитов к использованию против них антибактериальных препаратов. Полученный в итоге результат сможет помочь существенно сократить сроки и затраты, необходимые для лечения. А значит увеличит эффективность проводимой терапии. Стоит сразу сказать, что подобранные лабораторным способом лекарственные препараты не всегда могут оказаться эффективными для лечения реальной болезни.

Применение иммунологических методов анализа  позволяют изучить основные свойства имеющихся антител соединяться с конкретным антигеном. Чаще всего этот метод применяют для лечения хеликобактер пилори. Для этого в ходе исследования находятся антитела, отлично взаимодействующие с данным антигеном.

Различные виды проводимых исследований, основанных на анализе кала, дают возможность выявлять паразитов вроде лямблий, аскарид, пилори и т.д., способных заражать и успешно размножаться в организме человека. Кроме того, могут выясняться наличие различных заболеваний не связанных с деятельностью болезнетворных бактерий и микроорганизмов.

Так, используя копрограмму, есть возможность изучить работу системы  пищеварения, выявляя целый ряд заболеваний органов, входящих в систему. Проведение теста на скрытую кровь, позволит выяснить через анализ кала, есть ли скрытые кровотечения внутри прямой кишки.

Исследуя кал, есть возможность определять наличие в организме различных опасных бактерий и паразитов, в число которых войдут всем известные лямблии, существование которых способно причинять существенный вред. Их основная особенность заключается в том, что без точной диагностики, базирующейся на тщательном исследовании, невозможно определить, что человек болен. И это впоследствии может усложнить задачу, связанную с лечением.

Читайте также:  Сколько стоит анализ кала на микропейзаж

Источник

Для того чтобы понять, что такое ПЦР кала, следует знать, что же такое кал. Кал — это совокупность отходов жизнедеятельности и непереваренных остатков пищи человека, которые выводятся наружу из организма человека через кишечник путем испражнения. Нормальное протекание данного процесса (выведения кала из организма) крайне важно, так как эти экскременты — не что иное, как отходы, засоряющие организм и мешающие ему нормально функционировать при их скоплении. Кроме того, по данному виду отходов можно многое узнать о самом организме. Например, по анализам кала можно узнать о пищеварительном тракте, о желчевыводящей системе, о бактериальном балансе толстой кишки, о наличии скрытых кровотечений из желудочно-кишечного тракта, а также выявить наличие нежелательных микроорганизмов в кишечнике.

исследование анализов в лабораторииАнализов кала довольно много, и каждый из них имеет свои цели назначения и несет свою информацию. Например, с помощью копрограммы можно проанализировать работу пищеварительной системы, то есть выявить ряд заболеваний желудка, кишечника, поджелудочной железы, желчного пузыря и печени. Тест на скрытую кровь показывает наличие скрытого кровотечения из различных отделов желудочно-кишечного тракта. Такой анализ проводят при подозрении таких заболеваний, как язва желудка или двенадцатиперстной кишки, а также опухолевые заболевания.

ПЦР диагностика кала применяется для диагностики инфекционных заболеваний (например, лямблиоз), в том числе и инфекций, которые передаются половым путем.

То есть с помощью ПЦР кал человека может донести важную информацию о состоянии других органов.

Преимущества анализа ПЦР кала

Преимущества у данного анализа следующие:

  1. Прямое определение наличия возбудителей (если другие анализы выявляют только отходы жизнедеятельности паразитов, то данный метод указывает на фрагмент ДНК последних).
  2. Высокая специфичность (при данном анализе выявляется уникальный, характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК).
  3. Высокая чувствительность (ПЦР выявляет даже наличие единичной клетки вируса).
  4. Высокая скорость получения результата (результат данного исследования можно получить уже через 4-5 часов).

Полимеразная цепная реакция кала позволяет выявить целый ряд заболеваний, среди них СПИД, гепатиты, сифилис, хламидиоз, лямблиоз и др. Лямблиоз подразумевает наличие таких паразитов, как лямблии, широко распространен. Им болеют даже дети. Это обусловлено тем, что дети редко следят за гигиеной и часто, контактируя между собой, несколько небрезгливы. Причем это такое заболевание, при котором человек может даже и не знать, что болеет. То есть эти паразиты, находясь в организме человека, могут его абсолютно не беспокоить. И в настоящее время это считается нормальным. Данное состояние не лечат, пока оно спит. Но как только оно просыпается и дает о себе знать неприятными симптомами, необходимо обратиться к специалисту. На самом деле, даже если лямблии и не беспокоят, но каким-то случайным образом выявлены, лучше пройти лечение. А детям, которые часто находятся в коллективе, ПЦР кала на лямблию можно сдавать в регулярном порядке.

Как сдавать кал на ПЦР?

Если специалист назначил данный анализ, то перед его сдачей (за несколько дней) необходимо прекратить принимать слабительные препараты, ректальные свечи, масла, а также препараты, которые влияют на окраску кала (например, препараты с богатым содержанием железа). Для сбора материала используют только специальные стерильные контейнеры с палочкой. Ополаскивать или протирать чем-либо их не рекомендуется. При сборе экскрементов надо быть предельно аккуратным, чтобы не задеть внутреннюю часть контейнера рукой. Для сдачи анализа на ПЦР в калах не должна содержаться моча. Использование вспомогательных средств (например, клизмы) при испражнении для сдачи материала запрещено. Кал собирается в день сдачи, для чего должен быть собран в контейнер с помощью специально предназначенной для этого палочкой. Контейнер необходимо заполнить не более чем на 1/3.

Вот такие простые правила необходимо соблюдать при сборе материала для сдачи анализа ПЦР кала. Казалось бы, ничего сложного, но нарушение хотя бы одного из пунктов может исказить результат исследования, что может привести к лечению несуществующих паразитов.

Источник